ImageJ 中的 WB 灰度分析：从图像中提取定 lượng数据

简介

ImageJ 是一个免费且开源的图像处理软件，广泛用于生物医学研究。Western 杂交 (WB) 分析是一种常见的技术，用于检测蛋白质表达水平。WB 灰度分析是一种在 ImageJ 中对 WB 图像进行定量分析的方法，可提供蛋白质表达的定量测量。

步骤

1. 打开 WB 图像

在 ImageJ 中打开 WB 图像。确保图像处于 8 位灰度模式。

2. 选择感兴趣区域 (ROI)

使用选框工具选择靶蛋白条带的矩形 ROI。确保 ROI 仅包含条带本身，而避免背景。

3. 测量灰度

转到“分析”>“测量”以测量 ROI 的灰度值。将生成一个结果表，显示平均灰度、面积和周长等测量值。

4. 绘制曲线

转到“绘制”>“曲线”绘制条带灰度值的图表。这将产生一条随条带距离变化的灰度曲线。

5. 计算面积

如果要测量条带的面积，可以使用“阈值”工具进行二值化处理。然后可以通过“分析”>“Analyze Particles”来计算条带面积。

6. 导出数据

可以将测量结果导出为 CSV 或其他格式以进行进一步分析。

优点

定量分析蛋白质表达简便易行，使用免费软件允许比较不同样品和条件有助于识别差异表达的蛋白质

局限性

依赖于图像质量和条带大小可能会受到背景影响无法识别被遮蔽的条带

结论